国内刊号:11-2928/R
国际刊号:1003-9961
发布日期:
作者:谢玲,谷媛媛,唐东,谢雯,石元芳,谭燕,陈旭
关键词:乙型肝炎病毒, 纳米金横向流生物传感, 环介导恒温扩增, 快速检测
目的 基于环介导等温扩增(LAMP)结合纳米金横向流生物传感(AuNPs-LFB)技术,构建一种新型乙型肝炎病毒(HBV)便捷、可视化分子检测方法并评价其应用。方法以我国主要流行HBV基因型(B、C、D、B/C重组和C/D重组)的S基因为检测靶点,设计HBV-LAMP简并引物并建立HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法。 对HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法的反应温度和时间进行优化。 检测HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法的特异性和灵敏性。 采用传统荧光定量PCR方法和新构建的HBV-LAMP-AuNPs-LFB技术分别对临床疑似HBV感染者血清样本进行检测,评价新构建方法的临床应用性。结果本研究成功设计出一套HBV-LAMP简并引物用于构建HBV-LAMP-AuNPs-LFB检测方法。 该方法的最佳反应条件为68 ℃、30 min,其特异性为100.00%,未与其他病原体发生交叉反应。 该方法可检测含目标基因(HBV-S)质粒模板的最低浓度为10 拷贝/反应。 经临床样本验证,HBV-LAMP-AuNPs-LFB技术对HBV的检测结果与传统荧光定量PCR技术一致。结论本研究构建了一种操作便捷、特异性强、灵敏度高、无需昂贵检测仪器的HBV即时检测方法HBV-LAMP-AuNPs-LFB,可为HBV感染的治疗和防控提供新的实验室诊断依据。
来源:2026年第1期
《疾病监测》期刊编辑部