疾病监测杂志

疾病监测杂志2023年第12期

• 2023年11月全球传染病疫情概要

  韩辉,伍波,贾娇娇,宋悦谦

  2023年11月，全球共监测到传染病69种，涉及236个国家和地区。 除流感外，涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染（236个）、猴痘（116个）、登革热（34个）、麻疹（25个）和霍乱（18个）。 病死率位于前5位的传染病分别为人感染H5N1禽流感（52.3%）、拉沙热（17.1%）、克里米亚–刚果出血热（9.3%）、西尼罗热（8.6%）和白喉（5.6%）。 死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、疟疾、登革热、麻疹和霍乱。 亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚–刚果出血热和登革热；非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、拉沙热、白喉、疟疾、脊髓灰质炎和麻疹；美洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘和登革热；欧洲主要流行西尼罗热和麻疹。

• 2023年12月中国需关注的突发公共卫生事件风险评估

  朱可怡,涂文校,冯晔囡,白文清,谢怡然,张倩,任婧寰,施国庆,向妮娟,孟玲

  目的评估2023年12月在我国（不含香港、澳门特别行政区和台湾省，下同）发生或者可能由境外输入的突发公共卫生事件风险。方法根据国内外突发公共卫生事件报告及重点传染病监测等各种资料和部门通报信息，采用专家会商法，并通过视频会议形式邀请省（自治区、直辖市）疾病预防控制中心专家参与评估。结果预计2023年12月突发公共卫生事件数可能较11月有所上升，以流行性感冒（流感）、新型冠状病毒感染等多种呼吸道传染病为主。 我国境内新型冠状病毒感染疫情处于较低水平流行，急性呼吸道传染病持续上升，12月需继续密切关注冬季可能的新型冠状病毒感染疫情上升以及其他多种急性呼吸道传染病共同传播带来的临床诊疗压力。 男男性行为人群猴痘疫情传播风险仍然存在，一般人群感染风险较低。 当前南北方省份流感活动整体持续上升，部分省份上升趋缓，预计各省份在12月上旬至中旬会陆续达到流行高峰，流行强度为季节性水平。 百日咳疫情可能仍将处于较高水平。 非职业性一氧化碳中毒仍将处于高发期。结论对新型冠状病毒感染予以特别关注，对流感、猴痘、百日咳和非职业性一氧化碳中毒予以一般关注。

• 2023年11月全球新型冠状病毒感染疫情风险评估

  孙静,纪瀚然,武洁雯,杨昕娉,庞明樊,赵青,房元圣,张亦弛,薛秀丽,戚晓鹏

  目的评估2023年11月新型冠状病毒感染（COVID-19）疫情全球流行情况以及对我国的输入风险。方法根据世界卫生组织公开发布的每日 COVID-19 疫情数据，结合全球 COVID-19 入境政策分析，采用流行病学描述方法，通过总体概述、各大洲及重点国家疫情趋势综合评估和周边十四国疫情分析，对全球 COVID-19 疫情风险进行综合、全面与及时的评估。结果与2023年10月相比，全球月新增确诊病例下降了27.80%，月新增死亡病例下降了69.88%，全球月新增确诊病例前10 位国家中，俄罗斯、澳大利亚、新西兰和波兰为全球重点关注国家；各大洲月新增确诊病例前3位国家中，马来西亚为亚洲一般关注国家，毛里求斯和安哥拉为非洲一般关注国家，厄瓜多尔为南美洲一般关注国家。 俄罗斯是周边十四国特别关注国家。结论全球每日新增确诊病例和新增死亡病例11月份均呈下降趋势，多数国家疫情稳定。 对于重点国家要持续加强疫情监测，同相关机构建立沟通机制，互通有无，及时预警。

• 预防性生物制品用病原微生物菌(毒)种低温保藏技术指南(T/CAV 002—2023)(T/CAS 714—2023)

  中国疫苗行业协会，中国标准化协会

  本标准规定了预防性生物制品用病原微生物菌（毒）种低温保藏流程和技术要求， 适用于病原微生物菌（毒）种保藏中心、保藏专业实验室等保藏机构，以及涉及病原微生物菌（毒）种保管、使用和疫苗生产企业等单位。

• 《预防性生物制品用病原微生物菌(毒)种低温保藏技术指南》标准解读

  赵元元,郭宁,姜孟楠,胥义,魏强

  2023年4月10日，中国疫苗行业协会和中国标准化协会联合发布并实施《预防性生物制品用病原微生物菌（毒）种低温保藏技术指南》（T/CAV 002—2023、 T/CAS 714—2023）。 这是贯彻落实《中华人民共和国生物安全法》《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构“十四五”发展规划》中提出构建国家生物安全标准体系的重要体现。 标准以病原微生物资源长期、稳定、安全保藏技术需求为出发点，首次明确了低温保藏定义，以及冷藏保藏、超低温保藏、深低温保藏、冷冻干燥保藏4种低温保藏方式及其定义和操作规范流程。 标准的发布实施，将为确保国家生物资源保藏安全提供技术支撑，同时，也将推动低温生物学基础研究和关键技术与产品研发，助力疫苗研发等生物产业发展和生物科技创新。 本文从标准编制背景、标准结构与主要内容、标准应用与展望3个方面对标准进行全面的解读，使标准使用者对标准的内容和作用有准确的理解，支撑标准的宣贯与实施。

• 4种弯曲菌国家标准株实验室评价及应用分析

  王海瑞,顾一心,陈晓丽,周贵兰,张鑫,张茂俊

  目的 依据《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022），对空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、乌普萨拉弯曲菌和红嘴鸭（海鸥）弯曲菌4个菌种标准菌株病原特征进行实验室验证，评价应用标准菌株作为参比菌株进行弯曲菌检验标准实验室检测的可行性。方法 通过形态观察、生化试验及细菌动力学试验等方法获得标准菌株的菌落特点、形态特征、重要生化表型特征及运动特点；通过基因组测序获得菌株基因组水平遗传特征；通过琼脂扩散法和E-test法检测标准菌株的抗生素敏感性特征；通过空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验标准进行标准菌株作为参比菌种的应用评价。结果 标准菌株空肠弯曲菌NPRC（S） 01.13897、结肠弯曲菌NPRC（S） 01.13898、乌普萨拉弯曲菌NPRC（S） 01.13899和红嘴鸭弯曲菌NPRC（S） 01.13900均符合弯曲菌对应菌种的病原特征，可以作为弯曲菌检验的参比菌株。结论 本研究中的标准菌株具有相应菌种的病原特征，可作为弯曲菌检测及菌种鉴定的参比菌株。

• 沙门菌主要血清型标准菌株的筛选鉴定

  高翔,张龙飞,侯心娇,张萍,甄博珺,郭晓晨,孙慧颖,闫梅英

  目的依据《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022），获得8种沙门菌主要血清型标准株，并建立标准株筛选主要流程。方法分别对原代及传代沙门菌菌株进行形态学观察、生化试验及基因组测序分析，获得形态及生化典型、基因组稳定的标准菌株。结果从24株沙门菌中筛选获得8株分属8种血清型（伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、单相鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌）的菌株，这8株菌在沙门菌推荐用选择性培养基上形态典型，生化反应典型，传代后基因组变异较小，血清凝集结果稳定，可以作为沙门菌检验的参比菌株。 结论本研究通过筛选获得具有相应血清型病原特征的8种沙门菌主要血清型标准株，可作为沙门菌检测、血清分型质控、基因组进化分析的参比菌株，并为后续核酸标准品的研制提供基础。

• 基于不同基因型的中国莱姆病螺旋体菌株标准化研究

  段立科,侯学霞,张琳,郝琴

  目的建立莱姆病螺旋体中国株5种基因型（巴伐利亚疏螺旋体 、 伽氏疏螺旋体、阿弗西尼疏螺旋体、狭义伯氏疏螺旋体和扬子疏螺旋体）的标准菌株，为菌株鉴定、诊断试剂和疫苗研发提供基础。方法依据《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812－2022），针对中国莱姆病螺旋体5种主要基因型，选取5株菌株（PD91、MD86、FP1、CS4和QX-S13）。 首先接种到BSKⅡ培养基中培养，暗视野显微镜下观察菌株的形态学特点。 提取全基因组DNA，聚合酶链式反应扩增莱姆病螺旋体5S~23S rRNA基因间隔区并测序，将每株菌株不同代次培养物的产物序列分别进行比对分析。 随后使用多位点序列分析（MLSA）方法鉴定菌株基因型，同时将不同代次菌株MLSA聚类分析结果进行比对，验证菌株遗传学稳定性。 通过Illumina NovaSeq平台进行全基因组测序分析菌株基因组特征。结果5株菌株均具有莱姆病螺旋体典型形态学特征。 经特异性基因检测及MLSA分型鉴定，依次为巴伐利亚疏螺旋体（PD91）, 伽氏疏螺旋体（MD86）, 阿弗西尼疏螺旋体（FP1）, 狭义伯氏疏螺旋体（CS4）和扬子疏螺旋体（QX-S13）基因型，聚类分析显示与相应基因型国际参考菌株位于同一分支。 稳定性实验结果显示5株菌株不同代次培养物5S～23S rRNA基因间隔区序列相似性达到100.00%，5株菌株10代次和20代次培养物MLSA聚类分析结果一致，遗传学稳定性良好。 全基因组测序结果显示，基因组大小为1.26Mbp～1.80 Mbp，G+C含量为27.63%～28.20%，基因组功能和生物代谢模块分布基本相同，主要为维持细菌生长、繁殖、运动和应激等相关成分。结论PD91、FP1、MD86、CS4和QX-S13共5株菌株具有莱姆病螺旋体典型生物学、形态学特征，基因型及分子特征稳定，可作为中国莱姆病螺旋体5种基因型的标准菌株。 本研究可为建立中国莱姆病螺旋体标准化菌株体系提供基础，同时为菌株鉴定、莱姆病诊断试剂和疫苗研发提供相关资源。

• 结核分枝杆菌体外药敏试验标准株的建立与评价

  余泽林,李月,夏辉,宋媛媛,刘海灿,王瑞白

  目的按照《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022），对已有多年使用基础的5株中国临床来源结核分枝杆菌菌株进行系统鉴定评价，以此建立我国的结核分枝杆菌体外药敏试验标准株。方法建立标准的实验操作程序，对菌株进行培养特性、表型、生化特征、药敏试验及分子特征检测等系统评价，完成全基因组测序，建立主代及工作菌株库。结果菌株的表型、生化及分子生物学检测结果表明5株菌符合结核分枝杆菌特征，性状稳定；耐药类型为2株全敏感菌株，2株耐多药结核菌株和1株广泛耐药结核菌株；完成全基因组测序；已获得中国疾病预防控制中心病原微生物菌(毒)种保藏中心（CHPC）保藏编号。结论5个菌株符合结核分枝杆菌体外药敏试验质控菌株及抗结核药物筛选及评价测试菌株的要求，将为中国标准株的建立工作提供参考，为我国结核病耐药监测以及抗结核药物研发提供有力的支撑。

• 大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体标准菌株的建立与评价

  刘立雍,张倚玮,向才鑫,何利华,孟凡亮,刘洁,张建中,赵飞

  目的 依据病原微生物菌（毒）种国家标准菌株评价技术标准（WS/T 812—2022）建立大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体（Mp）标准菌株，加速我国Mp相关研究进展，推进国家病原微生物资源保藏体系建设。方法通过对菌株进行16S rDNA测序及特异性基因PCR鉴定，确定菌株为Mp菌株。 通过对标准菌株菌落形态观测、基因分型、活性测定、最低抑菌浓度（MIC）值测定、耐药基因检测等明确其生物学特征，并进行菌株稳定性和活性评价。结果标准菌株经16S rDNA测序及特异性基因PCR鉴定为Mp菌种，其连续传代后菌落形态及各种分子生物学特征稳定。 标准菌株对红霉素、克拉霉素和阿奇霉素体外MIC值范围分别为≥256 μg/mL、128 μg/mL～≥256 μg/mL和8 μg/mL～32 μg/mL，在基因水平上表现为23S rDNA基因A2063G突变。 标准菌株在−80 ℃条件下可稳定保存12个月，解冻后需尽快进行增菌培养，避免4 ℃或者室温保存，标准菌株使用时避免超过两次冻融。结论本研究建立并评价了大环内酯类抗生素耐药Mp标准菌株（CHPC 1.13907），为Mp疾病防控、科研以及药物和疫苗的研发等工作提供标准菌株。

• 耐唑类抗真菌药白念珠菌标准菌株的建立与评价

  魏销玥,张舒,耿圆圆,张慧芳,肖迪,张建中,龚杰

  目的建立耐唑类抗真菌药的白念珠菌（C. albicans）标准菌株，参照《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022）要求做好病原微生物菌（毒）种保藏工作，为其他真菌标准菌株的候选提供参考方法。方法通过菌株表型、鉴定、测试9种抗真菌药物敏感性和耐药基因，评估菌株保存状态下的表型稳定性和活性。结果菌株经内部转录间隔区（ITS）序列分析和质谱仪（MALDI-TOF MS）鉴定为白念珠菌，连续传代十次仍有稳定的分子生物学特征。 该菌株对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑的最低抑菌浓度（MIC）分别为16 mg/L、0.5 mg/L、0.5 mg/L和0.5 mg/L，耐药性与ERG11基因双点突变（A114S、Y257H）及编码药物外排泵基因突变（A736V）相关。 菌株在–80 ℃表型稳定至少6个月。结论本研究建立了耐唑类抗真菌药白念珠菌标准菌株，为白念珠菌感染性疾病的综合防治提供了重要的研究对象和物质基础，对于国家生物安全具有重要的战略意义。

• 4种中国常见致病性基因种钩端螺旋体标准菌株的建立与评价

  邱海燕,张翠彩

  目的依据《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022），建立Leptospira interrogans、L. borgpetersenii、L. alexanderi和L. weilii 4种中国常见致病性基因种钩端螺旋体标准菌株。方法以56601、56604、56615、56655 4株致病性代表菌株为研究对象，利用暗视野显微镜开展形态学观察。 以16S rRNA基因为靶基因进行聚合酶链式反应扩增、测序确定所属基因种。 通过多位点序列分型（MLST）方法，对4株代表株进行分子分型分析，确定每株菌株7个位点等位基因号和序列型别（ST）。 综合暗视野显微镜形态学观察、16S rRNA基因测序和MLST分型结果系统评价4株代表菌株经不同传代次数后的分子遗传学稳定性。 同时通过Illumina NovaSeq测序平台对56604、56615和56655开展全基因组测序分析，了解菌株基因组特征。结果暗视野显微镜下，4株代表菌株均具有典型的钩端螺旋体形态。16S rRNA基因序列分析显示，56601、56604、56615和56655分别隶属于L. interrogans、L. borgpetersenii、L. alexanderi和L. weilii 4种不同致病性基因种。 MLST分型结果显示4株代表株隶属于4种不同ST型。 4株代表株在亲代株及在体外连续传代一定代次后，暗视野显微镜下形态不变，所属基因种和MLST基因型结果一致，证明该4株代表株具有良好的分子遗传学稳定性。 基因组测序分析显示，4株代表株基因组大小为3.93～4.69 Mb之间，G+C含量为36.00%～40.87%。结论初步建立并评价了4种中国常见致病性基因种钩端螺旋体标准菌株，为钩端螺旋体病的疾病控制、临床诊断、教学科研、疫苗研发提供菌株资源。

• 嗜麦芽窄食单胞菌标准株的建立及评价

  李月,余泽林,王瑞白

  目的对1株嗜麦芽窄食单胞菌中国临床分离株进行系统性评价，建立嗜麦芽窄食单胞菌标准株。方法参照《病原微生物菌(毒)种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812－2022），对嗜麦芽窄食单胞菌中国分离株11066进行形态、运动性、培养条件、生化反应、药物敏感性、质谱等检测以及16S rRNA测序、多位点序列分型分析及全基因组测序等分子生物学检测，并对该菌株进行扩大培养，建立主代种子库及工作菌株库。结果菌株11066为革兰阴性杆菌，电镜下可见1～4根极端鞭毛；在血平板和其他营养琼脂上生长良好，生长条件为15～37 ℃、pH 5～10和0～5%盐浓度；动力阳性；硝酸盐还原试验阳性、水解七叶灵和明胶试验阳性；生长可利用葡萄糖、甘露糖、N-乙酰-葡萄糖胺、麦芽糖、柠檬酸和苹果酸为碳源；对阿米卡星、头孢西丁等18种革兰阴性菌常用抗生素耐药；主代种子库和工作菌株库菌株生物学性状稳定，传代等信息完整；菌株已保藏于中国疾病预防控制中心病原微生物菌(毒)种保藏中心并获得国家保藏编号。结论嗜麦芽窄食单胞菌中国临床分离株11066有明确的来源信息，具有典型的嗜麦芽窄食单胞菌生物学及遗传学特征，已按国家标准株评价标准进行评价并保存于公认的来源/保藏中心，可以作为标准株/参考株应用于临床病原微生物检测质控和基础科研。

• 肺炎链球菌国家标准株的建立与评价

  白霜,张鹏,赵伟,郑群,吴疆

  目的依据《病原微生物菌（毒）种国家标准菌株评价技术标准》（WS/T 812－2022）对肺炎链球菌临床分离株进行筛选，建立肺炎链球菌国家标准株候选株。方法通过对肺炎链球菌候选株菌落形态、染色特征、生化特性等进行菌种确认；通过乳胶凝集实验、荚膜肿胀实验、多重聚合酶链式反应、cpsB基因测序等进行菌种分型鉴定；利用Nanopore三代测序平台对菌种进行全基因组测序。结果在700余株肺炎链球菌临床分离株中，共筛选出21株具有肺炎链球菌典型特征的菌株纳入国家标准株候选株。 21株肺炎链球菌经3种方法分型诊断一致证实为血清型3、4、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、33F。 菌株稳定性实验结果显示，连续传代30代后，其菌落形态、染色特性、生化特性以及血清型与原代菌株均保持良好一致性。 研究所选21株肺炎链球菌均符合国家标准菌株的要求。结论本研究所获21株肺炎链球菌菌株具有相应病原菌的典型特征，可作为肺炎链球菌相关疾病监测、疫苗评价等工作的国家标准株的候选株。

• 高等级生物安全实验室终末消毒效果评价用枯草芽孢杆菌标准株的评价与应用

  王劲松,黄洋,龙新星,牛群,李康,叶强,徐潇

  目的依据《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022）建立高等级生物安全实验室终末消毒评价用枯草芽孢杆菌标准菌株。 方法 选择4株国内分离的枯草芽孢杆菌，通过对标准菌株菌落形态、染色特性、生化特性以及全基因组测序，对标准菌株进行生物学特性和分子特征分析；再将4种标准菌株制成一定浓度的菌片，与市售的菌片一起对动物生物安全三级实验室及关键防护设备进行终末消毒效果的评价。结果候选4株菌株均鉴定为枯草芽孢杆菌，全基因组均为环形，不含质粒；在相同消毒条件下，与ATCC9372一样，置于房间、生物安全柜和小鼠通风笼架4种候选菌株的菌片均可完全被杀灭。 结论本研究建立了高等级生物安全实验室终末消毒评价用枯草芽孢杆菌标准菌株，这些标准菌株的建立为消毒评价用菌株的国产化奠定了物质基础。

• 3株抗菌药物活性评价用标准菌株的建立与评价

  胡辛欣,王秀坤,陈虹彤,李国庆,孙琅,李聪然,游雪甫,杨信怡

  目的参照《病原微生物菌（毒）种国家标准菌株评价技术标准》（WS/T 812－2022），在实验室条件下对保藏于中国医学科学院病原微生物菌（毒）种保藏中心药用微生物相关菌（毒）种保藏分中心的大肠埃希菌CCPM（A）-P-000101、肺炎克雷伯菌CCPM（A）-P-000102、金黄色葡萄球菌CCPM（A）-P-000100菌株，分别测定病原微生物学特征，推动这3株细菌成为抗菌药物活性评价中使用的标准株。方法进行菌落形态和革兰染色观察，根据生化鉴定、抗生素敏感性测试、16S rDNA测序，以及多次传代后，观察和比较不同代次间细菌生长、药敏特性以及感染实验动物的100%最小致死量的差别，了解3株细菌的传代稳定性，明确其病原微生物学特征。结果菌落形态、革兰染色、生化鉴定、16S rDNA测序结果证明CCPM（A）-P-000101、CCPM（A）-P-000102、CCPM（A）-P-000100菌株具备大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌对应的典型特征，除对青霉素、氨苄西林等少数抗生素具有耐药性，3株细菌对多数受试抗生素具有敏感性表型。 3株细菌的G10菌株与G1菌株比较，生长曲线、药敏特征、感染实验小鼠的100%最小致死量均无显著差别，反映出它们的病原微生物学表型具有良好的传代稳定性。结论大肠埃希菌CCPM（A）-P-000101、肺炎克雷伯菌CCPM（A）-P-000102、金黄色葡萄球菌CCPM（A）-P-000100菌株各自对应的菌种特征典型、稳定，适合作为标准株用于抗菌药物活性的评价等研究。

• 病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术程序探讨

  卢晓贤,孙家玉,赵元元,黎薇,柯昌文,魏强,邓小玲

  2022年11月，国家卫生健康委员会发布了《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812—2022），明确了病原微生物菌（毒）种国家标准株的定义，对国家标准株的评价指标作出统一技术要求，并制定了国家标准株评价技术程序的基本框架。 为进一步开展国家标准株的评价工作，推动国家标准株支撑实际工作需要，有必要制定《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价工作指导书》等技术程序，阐述国家标准株的评价操作流程，确定提交国家标准株申请后菌（毒）株复核鉴定、评价组组建、资料审查、会议评价、评价结果报告等要求。 评价技术程序将成为国家病原微生物资源保藏标准体系的重要补充和拓展，有助于推动国家标准株应用落地，提高我国病原微生物资源整体保藏质量。

• 标准菌株的研究及应用进展

  李宜晓,王多春,魏强

  细菌的标准菌株一直以来都是微生物学研究的基石，标准菌株是由菌种保藏机构保藏、分类学地位明确、具有特定生物学性能、遗传学稳定并且可溯源的特殊功能和用途的标准样品，是日常工作及科学研究中的重要参考标准。 标准菌株应用广泛、需求巨大。 然而，目前国内外尚缺乏标准株统一定义及其筛选和评价技术标准。《病原微生物菌（毒）种国家标准株评价技术标准》（WS/T 812－2022）发布实施后，将为我国标准菌（毒）株研究和应用提供总体参考规范，并为各相关领域筛选、评价和确定标准菌（毒）株的方法提供技术依据。 因此，本研究通过对标准菌株相关背景、研究应用现状及存在的问题进行综述，以期为我国标准菌株标准化工作提供参考借鉴。

• 细菌活性检测方法研究进展及其应用探讨

  刘丽,魏强

  细菌活性检测是检验、评价和保藏的关键，快速、灵敏、特异和准确的细菌活性检测方法是十分重要的。 目前，细菌活性可以根据细菌生长繁殖能力、新陈代谢能力、细胞膜的完整性以及复制转录能力原理进行检测。不同的检测原理会有不同的检测方法，平板培养计数法是最为经典的活性检测方法，叠氮溴化丙锭结合定量聚合酶链反应（PMA-qPCR）、荧光染料结合流式细胞仪、单细胞拉曼分析技术等是新应用的方法。 随着科学技术的不断发展和细菌活性检测的需求，优化的细菌活性检测方法层出不穷，但不同的细菌活性检测方法具有不同的优缺点。 本文就目前细菌活性检测原理、方法、应用以及优缺点等方面进行描述，并探讨了细菌活性检测方法在细菌检验和保藏等方面的应用。

• 人类免疫缺陷病毒阳性与阴性肺结核患者流行特征及治疗转归对比分析

  林淑芳,周银发,陈代权,陈堃,陈江芬,戴志松

  目的通过分析福建省登记的人类免疫缺陷病毒（ HIV）阳性与HIV阴性的肺结核（PTB）患者流行特征、抗结核治疗转归及其影响因素情况，为制定和完善HIV阳性PTB的预防和控制政策提供参考依据。方法从“中国疾病预防控制信息系统”中收集2012—2021年福建省登记的PTB患者信息，采用χ2检验分析PTB患者流行特征与治疗转归差异，采用单因素和多因素logistic回归分析抗结核治疗未成功的危险因素，以P<0.05为差异有统计学意义。结果HIV阳性PTB患者中男性占比、年龄<60岁、农民工占比以及本地户籍占比高于HIV阴性PTB患者，差异具有统计学意义（相应的χ2值分别为37.365、4.775、22.448和22.826，均P＜0.05）。 HIV阳性PTB患者中治疗分类为复治和病原学检查结果为阳性占比均低于HIV阴性PTB患者，差异具有统计学意义（相应的χ2值分别为7.443和21.250，均P＜0.05）。 HIV阳性PTB患者抗结核成功治疗率（86.4%）明显低于HIV阴性PTB患者（91.7%），差异具有统计学意义（χ2=12.441，P<0.05）。 HIV阳性PTB患者出现抗结核治疗未成功危险是HIV阴性PTB患者的1.999倍（比值比=1.999，95%可信区间：1.448～2.759）。结论男性、职业为农民工或户籍为本地的PTB患者合并HIV感染的概率更大，而病原学阳性或治疗分类为复治的PTB患者合并HIV感染的概率更小。 合并HIV感染是PTB患者抗结核治疗未成功的独立危险因素。

• 2012－2022年浙江省台州市其他感染性腹泻流行特征及长期变化趋势分析

  顾明明,梁鸿镖,胡雅飞,徐飞祥,程强

  目的了解2012—2022年浙江省台州市其他感染性腹泻流行特征及长期变化趋势，为台州市其他感染性腹泻的监测、防控等工作提供依据与线索。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2012—2022年台州市其他感染性腹泻病例数据资料，以描述性流行病学研究方法分析流行特征；采用Joinpoint回归分析对2012—2022年台州市其他感染性腹泻发病率变化趋势进行分析。结果台州市2012—2022年共报告其他感染性腹泻病例144 460例，无死亡病例，年均报告发病率为212.74/10万。 男性年均报告发病率为231.26/10万，高于女性的192.94/10万，男女性报告发病率差异有统计学意义（P<0.001）；发病时间呈现一定的季节性分布，11月左右开始上升至次年1月达到发病高峰，自次年1月起开始逐步下降，至夏季呈现另外一个小高峰；9个县（市、区）均有病例报告，其中温岭市、临海市和仙居县，分别报告30 972、20 975和19 025例，占报告病例总数的49.12％；Joinpoint回归分析显示，2012—2022年总人群报告发病率呈现两个阶段波动，其中2012—2017年呈现上升趋势，但趋势差异无统计学意义［年度变化百分比（APC）=2.68%，P=0.539］，2017—2022年呈现下降趋势，趋势差异有统计学意义（APC=−15.14%，P=0.015），2012—2022年报告发病率总体变化呈下降趋势［平均年度变化百分比（APPC）=–6.66%，P=0.030］。结论2012—2022年台州市其他感染性腹泻发病率变化总体呈下降趋势，但仍处于较高水平，需积极开展综合防控措施。

• 2019－2022年山东省济南市百日咳流行病学特征分析

  武丛聪,谭丽,王琼,徐颖

  目的探讨2019—2022年山东省济南市百日咳报告病例发病率的时间变化趋势以及流行病学分布特点。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集济南市2019—2022年间的百日咳报告病例，运用描述性流行病学方法分析济南市百日咳的时间、空间以及人群分布特点。结果济南市2019—2022年百日咳年均报告发病率为4.57/10万，发病率呈先下降随后回升趋势。 百日咳发病主要集中在<1岁和1～3岁组，共计945例，占发病总数的57.17%，职业以散居儿童、幼托儿童和学生为主，占总发病的97.94%。 济南市百日咳在13个区（县）均有发病，以章丘区最高，占济南市发病总数的14.82%。 发病高峰月份为8月，占发病总数的10.22%。结论2019 — 2022年间济南市百日咳发病快速下降然后回升，且以低年龄儿童为主。 建议加强百日咳监测工作，推动百日咳疾病主动监测体系的建立，完善百日咳的预防控制的策略。

• 基于全球视角的中国丙型肝炎所致肝硬化疾病负担及变化趋势分析

  林玥彤,柳言,徐若愚,王家琛,王春平,滕文杰

  目的分析中国1990—2019年丙型肝炎（丙肝）所致肝硬化疾病负担及其变化趋势，为合理配置卫生资源和制定针对性的丙肝所致肝硬化防治策略提供依据。方法收集2019年全球疾病负担（GBD2019）中1990—2019年中国丙肝所致肝硬化相关数据，利用发病率、患病率、死亡率等指标，采用R软件ggplot2包与全球各级社会人口学指数（SDI）地区平均水平进行比较，使其结果可视化，分析丙肝所致肝硬化危险因素的变化情况。结果1990—2019年间，我国丙肝所致肝硬化发病率呈上升趋势，患病率呈先下降后上升趋势，死亡率呈下降趋势，随着年龄的增加，死亡率与患病率逐渐上升。 中国男性及50岁以上年龄组人群面临疾病负担较严重。 与全球不同SDI等级地区相比，自1996年后，中国伤残损失寿命年（YLDs）、早死损失寿命年（YLLs）、伤残调整寿命年（DALYs）均处于最低水平。 饮酒和药物滥用是导致我国丙肝引起的肝硬化的主要行为危险因素。结论丙肝所致肝硬化造成的伤残负担增大，尽管其所致的过早死亡得到了有效的控制，但仍为疾病负担的主要来源。 加强对丙肝的预防和控制，减少饮酒和药物滥用两种行为危险因素是防治工作的优先措施。

• 2021年新疆维吾尔自治区喀什市疏附县农村留守和非留守儿童溺水认知及高危行为调查

  金曼,穆尼热克孜·买买提依明,董航,王玉忠,晁先峰,张周斌

  目的了解新疆维吾尔自治区疏附县农村留守和非留守儿童关于溺水的认知和高危行为水平，为开展农村儿童防溺水干预提供科学依据。方法采取随机整群抽样的方法，于2021年12月随机抽取2个乡镇，对乡镇内所有小学一年级至初中二年级全部班级进行学生溺水状况问卷调查，采用χ2检验和非条件logistic回归分析溺水高危行为的危险因素。结果共调查中小学生14 543 人，发放问卷14 543份，回收问卷14 543份。 留守儿童在溺水方面的高危行为发生率高于非留守儿童（χ2=8.00，P＜0.05）。 留守儿童中性格内向的比率高于非留守儿童（χ2=100.250，P＜0.001），与家长（χ2=24.420，P＜0.001）和同学（χ2=35.420，P＜0.001）相处情况比非留守儿童差。 学校附近有开放性水域比值比（OR）=1.218，95%置信区间（CI）：1.088～ 1.364 、家附近有开放性水域（OR=1.893，95%CI：1.704～2. 102）、性格内向、较强的好奇心（OR=1.187，95%CI：1.048～ 1.345）、和同学相处较差（OR=2.596，95%CI： 2.142～3.146）、和家人相处较差（OR=1.913，95%CI：1.575～2.323）、更高的游泳水平（P＜0.001）是溺水高危行为的危险因素。结论 新疆维吾尔自治区疏附县需每年加强对中小学生溺水预防知识和急救培训，充分发挥防溺水学校教育和监护人监督作用，尤其加强对留守儿童心理健康和防溺水伤害监护的重视。

• 2022年北京市通州区一起霍乱疫情分离菌株的病原学特征分析

  张萍,邹林,高翔,杨郝亮,甄博珺,李伟红,郭晓晨,林长缨,李仁清,严寒秋,逄波

  目的分析2022年北京市通州区一起霍乱弧菌引起的疫情的病原学特征，并与引起通州区过往疫情的菌株进行比对分析。方法用实时荧光PCR方法检测样本中O1/O139群霍乱弧菌的特异性基因，同时按常规法对样本进行菌株的分离培养鉴定；用普通PCR方法检测霍乱弧菌的11种毒力基因；用微量肉汤稀释法进行12种药物的敏感性试验，采用NotⅠ限制性内切酶进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）和聚类分析，基于全基因组序列进行菌株遗传学分析。结果本次疫情共检出5株O1群小川型非产毒霍乱弧菌，所有菌株均携带ompU、toxR、tcpI、tcpAEL、hlyAEL、hlyACL和rtxC基因，不携带ctxAB基因，5株菌耐药情况一致，均为美罗培南–头孢噻肟–头孢他啶–链霉素–氨苄西林–氨苄西林/舒巴坦6种药物耐药，为多重耐药菌株。 PFGE分6种带型Ⅰ～Ⅵ，本次疫情菌株带型为Ⅱ型。 与通州区既往检出的菌株相比，与2011年2株产毒O1群小川型霍乱弧菌带型较为接近，耐药情况一致，毒力基因携带情况有所差异，但都携带tcpAEL基因。 遗传学分析显示本次疫情菌株为不同于第七次世界大流行菌株的新出现的克隆群。结论通州区流行的O1群霍乱菌株以多重耐药小川型非产毒株为主，PFGE带型分散，本次疫情菌株是新出现的克隆群，以后的霍乱防控工作中应重视此类菌株并制定相应的策略。

• 2022 年5月10日至 2023 年 3月7日美国猴痘相关死亡病例的流行病学和临床特征分析报告

  龚震宇（摘译）,龚训良（审校）

  美国在中度至重度免疫功能低下人群中已经出现猴痘重症病例。 2022 年5月10日至2023年3月7日期间，美国发生了38 例 猴痘相关死亡病例（病死率1.3/1000）。 大多数死亡病例是非西班牙裔黑人或非裔美国人（占87%）和同性恋男性（95%）。 死亡的24例艾滋病毒感染者都是晚期艾滋病病例，通常CD4细胞计数<50。 本研究表明公平和尽早获得猴痘和HIV的预防和治疗对于降低猴痘死亡率至关重要。