疾病监测

作者：杨露瑶,任小东,毛怡心,李梦洁,车艳晴,刘晓,孙志文,白雪梅,高鹤,刘小宁,王多春

关键词：食源性病原微生物, 多重定量聚合酶链式反应, 检测方法

目的建立一种检测6种常见食源性病原微生物的多重定量聚合酶链式反应（qPCR）方法。方法设计针对6种常见食源性病原体（单核增生李斯特菌、沙门菌、副溶血弧菌、诺如病毒、大肠埃希菌O157:H7、金黄色葡萄球菌）的特异性引物及多重qPCR探针，优化引物、探针序列及反应体系以建立多重qPCR方法。 对该方法进行标准曲线和检测限分析、特异性与抗干扰试验，并检测模拟样品以评价其适用性。结果本研究建立了六重两体系的qPCR检测方法，每个体系可检测3种病原体，两个体系中的最低检测限均为10 拷贝/µL，相关系数R2均>0.99，P值均<0.001。 6种目标病原体均出现对应扩增曲线，而非目标病原体均未出现，能够实现特异性检测。 同时，当检测体系中出现≥2种不同浓度的目标病原体时，相互之间无干扰和抑制现象。 模拟样品检测显示，该多重qPCR方法能够特异性对6种目标病原体进行检测。结论本研究建立了一种灵敏度高、特异性强的多重qPCR方法，可用于快速检测6种常见的食源性病原体。

来源：2025年第4期

《疾病监测》期刊编辑部

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