疾病监测

作者：刘海雯,徐玲,范玉,包桂英,陈俊杰,张天承,徐晴晴,赵鸿雁,朴东日,田国忠,任锋,姜海

关键词：布鲁氏菌, 微滴式数字聚合酶链式反应, 定量检测

目的 本研究旨在建立一种基于微滴式数字聚合酶链式反应（ddPCR）的检测方法，能够实现对布鲁氏菌病（布病）患者血液中布鲁氏菌核酸的定量与精准检测。方法以布鲁氏菌Bcsp31基因为靶基因，设计引物与探针并构建pUC57-Bcsp31重组阳性质粒，评价ddPCR方法检测布鲁氏菌的灵敏度、重复性与特异度。 此外，收集疑似布病患者血液120份，采用ddPCR方法对样本中布鲁氏菌DNA载量进行定量检测。结果本研究建立的ddPCR检测布鲁氏菌的方法具有很高的灵敏性，最低检出限为100拷贝/μL，并且对布鲁氏菌的检测呈现出良好的特异性与准确性。 120份血液样本中，ddPCR方法检出阳性103份，实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）方法检出阳性52份。 105份抗体阳性样本中，ddPCR方法与qPCR方法分别检出阳性93份和51份，阳性率分别为88.57%和49.52%。 15份抗体阴性样本中，两种方法分别检测出阳性12份和1份。结论本研究建立了一种基于ddPCR方法的高灵敏度、高特异度的检测布鲁氏菌的方法，能够实现布病患者血液样品中布鲁氏菌核酸的定量与精准检测。 尤其对于抗体阴性的疑似患者早期布病筛查具有重要意义。

来源：2024年第6期

《疾病监测》期刊编辑部

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