疾病监测

北大核心,CA,CSCD,WJCI,

国内刊号:11-2928/R

国际刊号:1003-9961

疾病监测杂志2023年第3期:恙虫病东方体环介导等温扩增可视化快速检测方法的建立

发布日期:

作者:曾志伟,韩腾伟,刘维俊,刘菁,徐国英,王加熊,周淑姮

关键词:恙虫病东方体, 环介导等温扩增, <i>groEL</i>基因, 可视化检测

&nbsp; 目的 &nbsp;利用环介导等温扩增(LAMP)可视化检测技术,建立一种灵敏、特异和简便的恙虫病检测方法。&nbsp; 方法 &nbsp;利用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V4,以恙虫病东方体热休克蛋白groEL基因作为靶序列,设计扩增引物,优化反应条件。 利用恙虫病东方体标准株评估灵敏度和特异度;收集42份恙虫病血样,分别采用LAMP、普通PCR和实时荧光定量PCR方法进行验证。 &nbsp; 结果 &nbsp;建立的LAMP方法可在61~65 ℃ 80 min内完成恙虫病东方体的快速检测,最低检测限为10 拷贝/μL,高于普通PCR方法2个数量级,高于荧光定量PCR方法1个数量级;对8种常见的自然疫源性疾病病原体检测均为阴性,特异度为100%;对42份恙虫病血样采用3种方法检测,阳性率一致,均为21.4%(9/42)。&nbsp; 结论 &nbsp;本研究建立的恙虫病东方体LAMP可视化检测反应快速,操作简便,灵敏特异,可在基层医疗卫生机构运用推广。

来源:2023年第3期

《疾病监测》期刊编辑部

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