疾病监测

作者：王毅,杨幸贵,刘英,黄俊飞,王铭,营夏,谭勤琴,胡勇,李世军

关键词：环介导恒温扩增, 纳米生物传感, 钩端螺旋体, 黄疸出血群

  目的   基于环介导恒温扩增（LAMP）结合纳米生物传感条（LFB）技术，建立并评价黄疸出血群钩端螺旋体（钩体）的LAMP-LFB快速检测方法。  方法   以黄疸出血群钩体O抗原基因簇中的糖基转移酶基因（gtf）为检测靶标并设计特异性LAMP引物。 通过对LAMP引物的特定标记（FIP-FAM和LF-Biotin）和优化试验，建立LAMP-LFB快速检测方法，并分析其灵敏度和特异性。 应用建立的LAMP-LFB、普通PCR方法和显微凝集试验（MAT），分别对53株钩体分离菌株进行鉴定，比较分析鉴定结果并评价LAMP-LFB方法的实用性。   结果   灵敏度和特异性试验显示，LAMP-LFB方法可检出黄疸出血群赖型56601基因组DNA的最低浓度为100 fg/µL，检测特异性为100%，与其余血清群和非钩体菌株核酸无交叉反应。 菌株鉴定结果显示，LAMP-LFB与MAT鉴定结果完全一致，符合率为100%，其敏感性高于PCR方法。 此外，LAMP扩增产物经LFB验证，可直接通过观察检测线（TL）和质控线（CL）进行结果判定。  结论   基于gtf基因建立的LAMP-LFB检测技术方便、快捷且重复性好，可快速、灵敏、特异地鉴定黄疸出血群钩体菌株，能够作为有价值的黄疸出血群钩体菌株快速鉴别或诊断方法。

来源：2022年第5期

《疾病监测》期刊编辑部

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