疾病监测

作者：王毅,王晓霞,王立程,韩丽梅,李沙,符晓莹,李欢,陈海,朱雄

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌, 类鼻疽, 环介导恒温扩增, 纳米生物传感器, 快速诊断

  目的   建立一种环介导恒温扩增（LAMP）结合纳米生物传感器（LFB）快速检测类鼻疽伯克霍尔德菌的快速方法，为临床检测提供依据。  方法   针对类鼻疽伯克霍尔德菌的Ⅲ型分泌系统基因设计LAMP特异性引物，建立LAMP方法，通过纳米生物传感判断结果，并应用临床样本对该方法进行评价。  结果   LAMP-LFB检测的最佳扩增条件为67 ℃反应40 min，对类鼻疽伯克霍尔德菌纯培养物DNA灵敏度达到100 fg，对258株菌株进行检测，包括227株类鼻疽伯克霍尔德菌和31株非类鼻疽伯克霍尔德菌，特异性为100%。 应用于46个临床样本检测时，与传统分离培养方法相比，达到100%的诊断准确率。 LAMP-LFB整个检测过程可在1 h内完成，包括15 min DNA制备，40 min LAMP扩增，2 min的LFB结果判读。  结论   本研究建立的LAMP-LFB技术是一种快速、灵敏、特异的检测类鼻疽伯克霍尔德菌的方法，可作为类鼻疽基础、现场和临床实验室诊断的潜在工具。

来源：2021年第8期

《疾病监测》期刊编辑部

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