国内刊号:11-2928/R
国际刊号:1003-9961
发布日期:
作者:郑皓,李文革,卢金星,陈小萍
关键词:M1磁珠富集, 念珠菌, 念珠菌血症, 检测方法
目的 建立3种基于重组人甘露聚糖结合凝集素(MBL)蛋白(M1蛋白)磁珠富集技术的血液微量念珠菌快速检测方法(荧光定量PCR法、微培养法、铺板培养法)。 方法 根据荧光定量PCR方法的扩增效果,比较3种裂解液(酵母裂解液、LSTE和TXTE)提取微量念珠菌DNA的效果;通过检测液体培养后的菌量,比较5种微培养液(PBS、SA、YPD、LB和BHI)的增菌效果;使用人血浆模拟样本评价建立的3种方法和标准血培养法对血液中微量念珠菌的检测效果。 结果 与TXTE和LSTE相比,酵母裂解液提取微量念珠菌DNA的效果最佳。 SA、YPD、LB和BHI 4种微培养液中的菌量随时间延长均有上升趋势,特别是BHI增菌效果最佳。 人血浆模拟样本中,荧光定量PCR法虽然能够在最短时间内(3.75 h)检测到病原菌,但不能检出全部阳性样本。 与传统血培养法相比,微培养法和铺板培养法可分别提前至少39 h和22 h获得检测结果,灵敏度为10菌落形成单位/mL(CFU/mL)。 结论 与传统血培养法相比,荧光定量PCR法、微培养法和铺板培养法均能有效缩短检测时间,并且有较高的特异性和灵敏度。
来源:2021年第6期
《疾病监测》期刊编辑部