疾病监测

作者：贾筱溪,张文竹,王媛媛,李文革,卢金星,吴媛,马超锋

关键词：艰难梭菌, 耐莫西沙星, <i>gyrA</i>, 检测方法

&nbsp; 目的 &nbsp;建立一种检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法。&nbsp; 方法 &nbsp;设计针对艰难梭菌gyrA基因的特异性引物，并针对莫西沙星耐药株和敏感株的gyrA基因突变位点设计不同的TaqMan-MGB探针，优化可同时检测ATT、ACT突变点的双重荧光定量PCR方法，验证该方法的灵敏性、特异性和重复性，并进行应用评价。&nbsp; 结果 &nbsp;该方法对莫西沙星耐药株和敏感株gyrA基因突变位点的检测下限分别可达4 copies/μL和5 copies/μL，对艰难梭菌以外其他常见肠道菌群的检测均为阴性。 重复性检测结果显示，批间和批内变异系数均&lt;5%，该方法的检测结果与测序结果一致性高（k=0.98）。&nbsp; 结论 &nbsp;针对耐莫西沙星艰难梭菌gyrA基因点突变建立的双重荧光定量PCR方法，灵敏且具有很高的特异性和重复性，可有效鉴别艰难梭菌莫西沙星敏感株和耐药株，并可辅助识别流行株BI/NAP1/RT027的暴发。

来源：2021年第4期

《疾病监测》期刊编辑部

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