疾病监测

北大核心,CA,CSCD,WJCI,

国内刊号:11-2928/R

国际刊号:1003-9961

疾病监测杂志2020年第10期:基于重组甘露糖结合凝集素蛋白–磁珠富集技术检测血流感染新型隐球菌的方法

发布日期:

作者:陈晓丽,李文革,郑皓,陈小萍,卢金星

关键词:甘露糖结合凝集素, 磁珠富集, 血流感染, 新型隐球菌

目的建立一种基于重组甘露糖结合凝集素(MBL)蛋白–磁珠富集技术快速检测血流感染新型隐球菌的方法,为临床确诊新型隐球菌感染提供指导。方法利用Western blot方法检测重组MBL蛋白(M1)与新型隐球菌定性结合的情况;利用磷酸缓冲盐溶液(PBS)与兔血模拟样本检测M1-protein A磁珠对不同浓度梯度的新型隐球菌的捕获情况;比较3种不同方法[方法1,M1-protein A磁珠富集后直接进行qPCR鉴定;方法2,M1-protein A磁珠富集后培养加质谱鉴定;方法3(金标准),血培养加质谱鉴定]检测血液新型隐球菌的优劣。结果M1蛋白与新型隐球菌标准株及临床株普遍结合;不同浓度梯度新型隐球菌的PBS与兔血模拟阳性样本中,M1-protein A磁珠复合体的富集效率为18.00%~83.00%;3种新型隐球菌鉴定方法中,方法1耗时最短(4.25 h),灵敏度为10菌落形成单位/毫升(CFU/ml);方法2灵敏度可达到≤ 1 CFU/ml,总时间57 h;作为临床诊断金标准的方法3灵敏度虽也能达到≤1 CFU/ml,但耗时较长,需120 h。结论采用磁珠富集结合qPCR、MALDI-TOF MS技术,比传统血培养大大缩短了检测时间,并且具有较高的灵敏度和特异度。

来源:2020年第10期

《疾病监测》期刊编辑部

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