疾病监测

作者：李樊,郭晓芳,殷启凯,申辛欣,付士红,许松涛,雷雯雯,周红宁,马学军,王环宇

关键词：塔希纳病毒, 检测, 核酸, 重组酶介导扩增

目的采用反转录重组酶介导核酸扩增（RT-RAA）方法建立塔希纳病毒（TAHV）检测方法。方法在TAHV S节段保守区设计引物和探针。 用构建含检测目的基因片段的质粒和病毒细胞培养物对TAHV 的RT-RAA检测方法的灵敏性进行评价，通过检测黄病毒属、甲病毒属、正布尼亚病毒属和东南亚十二节段病毒属共7种病毒验证方法的特异性。 并选用2018年采集自宁夏回族自治区的30批次蚊虫样本来评价该检测方法。结果该方法对构建的质粒标准品的检测下线为100拷贝/反应，病毒培养物最低检出限为10空斑形成单位/反应， 与其他7种虫媒病毒无交叉反应。 在检测蚊虫样本时，该方法与实时定量PCR方法检测结果的一致性为100%。结论建立了快速、特异以及灵敏的TAHV的RT-RAA检测方法，并适用于标本中TAHV核酸的现场检测。

来源：2020年第3期

《疾病监测》期刊编辑部

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